该染液用途:用于组织切片、血细胞涂片、骨髓涂片、阴道分泌物(妇科白带)涂片,脱落细胞涂片、细菌、染色体显带、寄生虫等染色。其检验原理:瑞氏-姬姆萨染色液是利用RomanowskyStain技术原理改良而成的。姬姆萨染色液主要成分是天青II和伊红组成,瑞氏染液主要由亚甲基蓝和伊红组成。天青II和亚甲基蓝是碱性染料,而伊红是酸性染料,前者能够和细胞内的酸性物质结合,后者能够和细胞内的碱性物质结合。不同细胞的化学性质不同,对各种染料的亲和力也不同。因此,标本经过复合染色后,各类细胞会呈现不同着色,进而观察所染标本的形态特征。
瑞氏-姬姆萨染色液使用说明书
产品:瑞氏-姬姆萨染色液(套装)
货号:GO-R030
规格:2x100mL(套装)
组分:
瑞氏-姬姆萨染色液(A) | 100mL |
磷酸盐缓冲液(B) | 100mL |
用途:用于组织切片、血细胞涂片、骨髓涂片、阴道分泌物(妇科白带)涂片,脱落细胞涂片、细菌、染色体显带、寄生虫等染色。
保存:室温,密封,阴凉通风处避光保存。
有效期:未开封染液,有效期为18~24个月;开封后染液,建议6个月内使用完。每次用完,请注意及时捏紧瓶盖,以免挥发和变质。
检验原理:瑞氏-姬姆萨染色液是利用RomanowskyStain技术原理改良而成的。姬姆萨染色液主要成分是天青II和伊红组成,瑞氏染液主要由亚甲基蓝和伊红组成。天青II和亚甲基蓝是碱性染料,而伊红是酸性染料,前者能够和细胞内的酸性物质结合,后者能够和细胞内的碱性物质结合。不同细胞的化学性质不同,对各种染料的亲和力也不同。因此,标本经过复合染色后,各类细胞会呈现不同着色,进而观察所染标本的形态特征。
样本要求:
1、血细胞涂片染色:要求新鲜全血或EDTA(2K)抗凝血;
2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色:新鲜标本离开人体涂片后,需尽快以火焰或酒精固定,以避免细胞变形;
3、骨髓涂片染色:涂片制成后,应在空气中,快速摇动或扇干,防止细胞皱缩变形,或因空气潮湿而溶血,绝对不能用高温或者火烤;
4、脱落细胞涂片染色:采取检体并涂片,待检涂片涂片固定后,可采用自然干燥法或湿片固定液固定法。采取那种固定法,需要考虑检体和固定液的种类要求进行。由于湿片固定法,标本浸润时间会稍长,效果会更好,所以通常采用湿片固定法。若采用湿片固定液固定标本,固定液使用后,需要经常过滤,更换,防止细胞交叉污染。
自备材料:系列乙醇,甲醇,二甲苯等
操作方法(仅供参考):
(一)样本前处理:
1. 石蜡切片
(1) 二甲苯中脱蜡5~10分钟;
(2) 换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5~10分钟;
(3) 无水乙醇5分钟;
(4) 90%乙醇2分钟;
(5) 80%乙醇2分钟;
(6) 70%乙醇2分钟;
(7) 切片备用。
2. 冰冻切片:蒸馏水洗涤2分钟,切片备用。
3. 血液或骨髓涂片:常规方法制备切片、血液涂片或骨髓涂片或细胞涂片,待涂片自然干燥后,涂片备用。
(二)染色:
1. 备用切片或者涂片置于染色架上;
2. 取瑞氏-姬姆萨复合液(A)和等量磷酸盐缓冲液(B)等量混合,即为瑞氏-姬姆萨工作液;滴加适量工作液,轻轻晃动玻片,室温静置(血涂片1~5分钟,骨髓涂片10~30分钟);
3. 用自来水或蒸馏水从玻片一端轻轻冲洗,时间控制在30秒左右;
4. 干燥,镜检。
结果观察(仅供参考):
血红蛋白,嗜酸性颗粒 | 粉红色 |
细胞核,淋巴细胞,嗜碱性颗粒 | 紫蓝色或蓝色 |
原始红细胞,早幼红细胞胞质和核仁 | 蓝色 |
中幼红细胞 | 红蓝色或灰红色 |
完全成熟红细胞 | 粉红色 |
中性粒细胞 | 淡紫红色 |
单核细胞 | 蓝紫色或紫红色 |
注意事项:
1. 使用场所应通风,操作人员要做好个人防护,建议带手套,穿防护衣操作,操作人员操作时,工作应流畅,不熟练者,建议先小批量与实验室,以确定最佳浓度和最佳染色时间;
2. 血液涂片或骨髓涂片要适宜,厚薄均匀,以免影响染色效果;
3. 涂片染色中,请勿先去除染液,或者直接对涂片用力冲洗;
4. 染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物,建议滤纸过滤后使用
5. 染色过深,可用甲醇或者乙醇脱色,不建议复染;
6. 染色过深,可减少染色时间,或微调工作液浓度;同理,若染色过浅,可加大染色时间,或调整工作液浓度;
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