EDTA 脱钙液(10%)使用说明书
产品:EDTA脱钙液(10%)
货号:GO-R052
规格:500mL
保存:室温阴凉保存,有效期一年;开封后,建议尽快使用完毕。
产品简介:本品是一定量的EDTA溶于相应体积的无RNA酶水中配制而成。
用途:对含钙组织进行脱钙。
原理:高钙组织,如骨组织,一般不宜直接用石蜡进行包埋,其主要原因是,钙和石蜡之间密度不同,较难切除完整切片。对于这些含钙组织,常规要进行脱钙处理,然后进行下游实验。EDTA是一种常用螯合剂,能够和组
织内的钙进行螯合,对组织结构影响较小,可以较好保存组织某些成分,如酶类。但是,该种方法,脱钙速度较慢,一般需要数周甚至数月,需要根据实验要求,选用合适脱钙方法。
使用方法(以骨组织为例,仅供参考):
1. 骨组织取材,厚度大约5mm,不宜过厚;
2. 组织选用合适方法,及时固定;
3. 组织固定后,用PBS清洗3次,每次20分钟;
4. 再用蒸馏水清洗3次,每次20分钟;
5. 组织转移至20~30倍体积的EDTA脱钙液中,脱钙10~30天左右,甚至更长时间。如果要加快脱钙速度,可以置于37℃进行脱钙,建议每周更换一次脱钙液,直至终点;也可采用微波快速脱钙法,将微波炉设在200W左
右的档位,每次加热5分钟,依据组织厚度和密度重复3~5次,中间间隔3~5分钟(脱钙终点判断方法:用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时,没有阻力感,即可终止脱钙。);
6. 脱钙后组织用蒸馏水冲洗数次;
7. 进行脱水包埋等下游操作。
注意事项:
1. 厚度5mm的组织脱钙时间一般10~30天;
2. 适当加温,能加快脱钙速度,但温度不可过高,过高容易导致组织松散解体,一般温度为37~40℃;
3. 脱钙要彻底,但要防止脱钙过度,脱钙时间过长,会引起组织损害,要勤观察,勤检查,防止过度。
4. 由于EDTA的螯合作用,脱钙用具尽量避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器;
5. 脱钙应该在组织固定之后,不可先脱钙后固定;
6. 通过物理方法判断脱钙终点,可能对组织结构有一定的损害,尽量避免用力过大或反复检测。
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厂家信息:
公司:北京瀚海拓新生物技术有限公司
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